正就读中学的少年迈尔斯·莫拉莱斯，在布鲁克林过着普通而叛逆的青春生活。一次偶然，他被一只遭受放射性污染的蜘蛛咬伤，身体随之发生奇异变化，获得了隐身与电击等超能力。某夜，他目睹蜘蛛侠与金并的决战，并亲眼见证蜘蛛侠为阻止超级对撞机而牺牲。对撞机的爆炸撕裂了时空，来自不同宇宙的蜘蛛侠——彼得·B·帕克、格温·斯黛西、暗影蜘蛛侠、潘妮·帕克和蜘猪侠——被意外卷入迈尔斯的世界。众人发现，金并企图再次启动对撞机，以找回逝去的家人，但这将导致整个多元宇宙崩塌。为阻止灾难，蜘蛛侠们必须合作，将迈尔斯培养成新一代英雄。然而，迈尔斯起初无法稳定控制能力，屡屡受挫。在导师们的鼓励与自身信念的驱动下，迈尔斯逐渐掌握力量，领悟到“任何人都能成为英雄”的真谛。最终，他鼓起勇气，与伙伴们并肩作战，摧毁对撞机，将各位蜘蛛侠送回各自宇宙，同时也在自己的世界中，真正成长为独一无二的蜘蛛侠。